ANA (priešbranduolinių antikūnų) diagnostinis tyrimas

Antinuklearinių antikūnų (ANA) testas naudojamas kaip pagrindinis testas siekiant įvertinti paciento autoimuninių jungiamojo audinio sutrikimų būklę. Tai yra sutrikimai, kurie veikia daugelį audinių ir organų visame kūne. Ką rodo testo rezultatai? Kas yra ANA? Kokias ligas galima aptikti ANA?

Turinys:

1. ANA testas - kas yra antinukleariniai antikūnai?
2. ANA testas - naudojimas diagnostikoje
3. ANA testas - ANA buvimas sveikų žmonių kraujyje
4. ANA testas - koks vardas?
5. ANA testas - kada turėtų būti atliekamas ANA testas?

ANA santrumpa kilusi iš angliško pavadinimo anti-nucleus antikūnų, kuris lenkų kalboje verčiamas kaip „antinukleariniai antikūnai“. Šios molekulės priklauso baltymams, vadinamiems autoantikūnais, kurie yra baltymai, kurie puola juos gaminantį kūną.

ANA testas - kas yra antinukleariniai antikūnai?

Žmogaus organizme yra daug gynybos mechanizmų nuo patogenų. Vienas iš jų yra humoralinis imunitetas. Jis pagrįstas apsauginių antikūnų gamyba. Sveikiems žmonėms imuninė sistema gamina antikūnus prieš svetimus antigenus.

Tačiau kartais pasitaiko situacijų, kai gaminami autoantigenai, nukreipti prieš mūsų pačių kūno baltymus. Šis procesas yra būtinas autoimuninių ligų genezei.

Antinukleariniai antikūnai puola baltymus ir kitas molekules, kurios sudaro branduolį.

Yra daug skirtingų ANA tipų. Šių antikūnų skaidymas pagrįstas branduolinių komponentų, į kuriuos nukreiptos šios molekulės, tipais. Priklausomai nuo tipo, ANA gali prisijungti ir prie atskirų baltymų, ir prie kompleksinių kompleksų.

Pavyzdžiui, yra antikūnų prieš branduolinius kanalus ir histonus, t. Y. Molekules, ant kurių suvyniota DNR.

ANA puolimą galima išskirti:

• GUT
• histonai
• ribonukleoproteinai
• Branduolinė RNR
• nonhistono baltymai

Visi išvardyti komponentai yra būdingi ląstelės branduoliui.

ANA kraujyje yra visų rūšių ligų metu. Tai apima autoimuninius sutrikimus, vėžį ir kai kurias infekcijų rūšis. Tai leidžia naudoti priešbranduolinius antikūnus diagnozuojant tam tikras ligos būsenas.

ANA testas - naudojimas diagnostikoje

ANA testas naudojamas antinukleariniams autoantikūnams aptikti paciento kraujyje. Šis tyrimas yra svarbus diagnozuojant tokias ligas kaip:

• sisteminė raudonoji vilkligė
• Sjögreno sindromas
• sklerodermija
• polimiozitas
• dermatomiozitas
• autoimuninis hepatitas
• vaisto reakcijos sukeltas valcavimas

Teigiamas ANA testo rezultatas yra diagnostinis tik tuo atveju, jei klinikiniai simptomai tai patvirtina. Antinuklearinių antikūnų tyrimas taip pat gali būti naudingas stebint ligos progresavimą.

Tipiniai testai, naudojami ANA aptikti ir įvertinti, yra šie:

• netiesioginė imunofluorescencija
• ELISA fermento imunosorbento testas

Netiesioginės imunofluorescencijos metodas

Netiesioginė imunofluorescencija yra vienas iš dažniausiai naudojamų ANA testų. Paprastai šiame bandyme naudojamos Hep-2 ląstelės. Ant mikroskopo stiklelių jie dedami plono sluoksnio pavidalu. Tada ant jų uždedamas serumas ir inkubuojamas su Hep-2 ląstelėmis.

Jei paimtame mėginyje yra ANA, jie po inkubacijos laikotarpio nustatomi tokia forma, kuri yra susijusi su ląstelės branduolio antigenais. Tai galima pamatyti pridedant fluorescencinę etiketę, kuri jungiasi prie antikūnų.

Dažniausiai šiam tikslui naudojamas fluoresceinas arba rodopsinas B izotiocianatas (FITC) arba rodopsinas B. Molekula fluorescuoja, kai jai veikiamas tam tikro bangos ilgio šviesos pluoštas. Fluorescencijai stebėti ir įvertinti naudojamas mikroskopas.

HEp-2 ląstelėse galima pastebėti skirtingus fluorescencijos modelius, atsižvelgiant į antikūnų, esančių žmogaus serume, tipą ir antigeno lokalizaciją. Jų analizė leidžia nustatyti mėginyje esančių antikūnų tipus.

Antikūnų kiekis nustatomas atliekant serijinius kraujo serumo praskiedimus. ANA testas laikomas teigiamu, jei fluorescencija stebima esant titrui 1: 40/1: 80. Tačiau rezultatas, viršijantis 1: 160, turi didelę diagnostinę reikšmę.

Fermentų imuninė analizė (ELISA)

Fermento imuninė analizė (ELISA) naudoja mikrotitravimo plokšteles su antigenais ANA aptikti. Kiekvienas plokštelės šulinys yra padengtas vienu arba keliais antigenais. Tai padeda nustatyti specifinius antikūnus.

Kraujo serumas inkubuojamas plokštelių šuliniuose ir tada nuplaunamas. Jei mėginyje buvo priešbranduolinių antikūnų, po plovimo jie liks surišti su atitinkamais antigenais ant mikrotitravimo plokštelės.

Kitame bandymo etape ant plokštelės duobutės pridedamas antras su fermentais susijęs antikūnas. Fermentinė reakcija sukelia tirpalo spalvą.

Spalvų skirtumas yra proporcingas antigeną surištų antikūnų kiekiui plokštelės šulinyje. Gauto tirpalo spalvą galima įvertinti spektrofotometriniu metodu, t.y., išmatuojant tirpalu perduodamos šviesos pluošto intensyvumą.

ANA testas - ANA buvimas sveikų žmonių kraujyje

Apskaičiuota, kad 5% žmonių populiacijos kraujyje yra antinuklearinių antikūnų, kurių koncentracija laikoma diagnostiškai reikšminga, neatsižvelgiant į tai, ar yra ligos būklė.

Senstant ANA dažnis didėja, net 10–37% sveikų žmonių, vyresnių nei 65 metų, testuoja ANA. Tokie atvejai labiau būdingi moterims nei vyrams.

ANA testas - koks vardas?

ANA bandymui būdinga vertė yra titras. Tai rodo serumo praskiestumo laipsnį, kai antinukleariniai antikūnai tampa neaptinkami. Kuo didesnė ANA koncentracija kraujyje, tuo didesnis titras yra tyrimo rezultatuose.

Antiterapinių antikūnų specifiškumo testą rekomenduojama atlikti, jei titras yra didesnis nei 1: 160. Šie papildomi tyrimai turėtų būti atliekami kartu su paciento klinikinės istorijos analize ir fizine apžiūra. Šių veiksmų tikslas yra diagnozuoti arba atmesti autoimuninius sutrikimus.

Tačiau reikia pažymėti, kad toks rezultatas pasireiškia 5% pacientų, neatsižvelgiant į ligos būklę. Tyrimo rezultatas yra diagnostinis tik tada, kai yra kitų ligos simptomų.

Neigiamas ANA tyrimo rezultatas rodo, kad mažai tikėtina, kad pacientas serga vilklige ar kita autoimunine liga.

ANA testas - kada turėtų būti atliekamas ANA testas?

ANA testas skiriamas, kai paciento simptomai rodo sisteminį autoimuninį sutrikimą. Jie gali būti labai neakivaizdūs ir nekonkretūs, laikui bėgant gali keistis.

Simptomų pavyzdžiai:

• Žemas karščiavimas
• Nuolatinis nuovargis
• Į artritą panašus skausmas
• Raudonas bėrimas
• Odos jautrumas šviesai
• Plaukų slinkimas
• Raumenų skausmas
• Rankų ar kojų tirpimas ar dilgčiojimas
• Organų ir audinių uždegimas (inkstai, plaučiai, širdis, širdies gleivinė, centrinė nervų sistema ir kraujagyslės)

Literatūra:

1. https://labtestsonline.org/tests/antinuclear-antibody-ana
2. „Medicinos objektų antraštės“. Nacionalinė medicinos biblioteka. 2013 m. Vasario 12 d.
3. „Antinuklearinių antikūnų tyrimas: ką tai reiškia“. Amerikos vilkligės fondas. Žiūrėta 2013 m. Birželio 7 d
4. Kumaras, Y; Bhatia, A; Minzas, RW (2009 m. Sausio 2 d.). "Antinukleariniai antikūnai ir jų nustatymo metodai diagnozuojant jungiamojo audinio ligas: kelionė peržiūrėta". Diagnostinė patologija
5. www.autopróbciala.info
6. Kavanaugh, Arthuras, Tomaras, Russellas, Reveille'as, Jonas, Saliamonas, Danielis H. ir kiti. Antinuklinių antikūnų tyrimo ir specifinių autoantikūnų prieš branduolinius antigenus tyrimų klinikinio naudojimo gairės. Patologijos ir laboratorinės medicinos archyvai. 124 (1), p. 71–81, 2000 m. Sausio mėn

Apie autorių

Sara Janowska, tarpdisciplininių farmacijos ir biomedicinos mokslų krypties doktorantūros studentė Liublino medicinos universitete ir Balstogės biotechnologijos institute. Liublino medicinos universiteto farmacijos studijų absolventė, specializavusi augalų mediciną. Ji įgijo magistro laipsnį, apgynusią farmacinės botanikos srities darbą apie ekstraktų, gautų iš dvidešimties samanų rūšių, antioksidacines savybes. Šiuo metu savo moksliniame darbe jis nagrinėja naujų priešvėžinių medžiagų sintezę ir jų savybių tyrimus vėžio ląstelių linijose. Dvejus metus ji dirbo farmacijos magistre atviroje vaistinėje.

Skaitykite daugiau iš šio autoriaus