Srauto citometrija yra diagnostinė ir tyrimo technika, žinoma daugelį metų ir plačiai naudojama onkologijoje. Srauto citometrija leidžia ląsteles, sudarančias suspensiją laminarinėje arba stratifikuotoje skysčio srovėje, ištirti prietaisu, vadinamu srauto citometru. Kokios yra srauto citometrijos indikacijos ir kaip tai daroma?
Srauto citometrija naudojama diagnozuojant hematologines neoplazmas, nes tai yra skysti navikai, tačiau tai yra tik pagalbinis metodas. Tačiau verta prisiminti, kad yra vienas vėžys, kurį galima diagnozuoti tik taikant šį metodą. Tai yra lėtinė limfocitinė leukemija.
Sergant kitomis neoplastinėmis ligomis, srauto citometrija naudojama kaip diagnostinė pagalba, nes ji parodo labai svarbias neoplastinių ląstelių ypatybes. Šis metodas taip pat naudojamas vertinant taikomo gydymo efektyvumą.
Srauto citometrija - ką ji rodo?
Skysčio srautas, kuriame yra bandomosios dalelės, pastoviu greičiu (100–2000 dalelių per sekundę) praleidžiamas per citometro matavimo plotą. Čia optiniai metodai analizuoja ląstelių formas, matmenis, vidinę struktūrą ir jų turinį, pvz., DNR. Visos ląstelės yra optiškai pažymėtos.
Matavimai grindžiami lazerio šviesos sklaidos savybėmis atskirose ląstelėse ar jų komponentuose (branduoliuose, chromosomose, mitochondrijose) arba jų sukelta fluorescencija.
Optiniai signalai paverčiami elektriniais signalais, kurie po analizės grafiškai pateikiami kaip mono- arba biparametriniai pasiskirstymai.
Citometras taip pat leidžia daleles atskirti išėjus iš matavimo zonos. Galima sakyti, kad aparatas sutvarko (išskiria) ląsteles su tais pačiais sudedamaisiais elementais (paruošiamasis rūšiavimas) arba išskiria tam tikrų tipų ląsteles (analitinis rūšis).
Srauto citometrija leidžia tirti ląstelių populiacijos charakteristikas, analizuoti ląstelių komponentus (ypač tokius kaip nukleino rūgštys, baltymai, paviršiaus ir ląstelių antigenai), fermentinį aktyvumą, membranos potencialą, mitochondrijų aktyvumą, viduląstelinį pH, jonų transportą ir membranos skystumą.
Srauto citometrija - taikymas
Diagnostikoje naudojama srauto citometrija leidžia nustatyti neoplastinių ląstelių fenotipą ir atskirų baltymų išraišką. Norėdami tai pasiekti, naudojami žymėti fluorescuojantys antikūnai, kurie būdingu būdu suriša ląstelės membranos paviršiuje esančius antigenus. Dėl to galima nustatyti jų diferenciacijos laipsnį, kilmę, prognostinius ir terapinius žymenis, kurie palengvina sprendimą dėl tolesnių diagnostinių ir terapinių procedūrų.
Kitas srauto citometrijos taikymas yra taikomo gydymo efektyvumo stebėjimas, įvertinant vadinamąjį „liekamoji liga“ - tai ląstelių, turinčių į naviką panašių fenotipų, dalis, likusių po gydymo.
Srauto citometrija taip pat palengvina vėžio ligų tyrimus. Šio metodo dėka galima ieškoti, pavyzdžiui, receptorių, kurie yra neoplastinių ląstelių paviršiuje ir gali tapti gydymo objektais.
Metodas leidžia įvertinti baltymų aktyvumą ląstelės viduje. Taip pat galima įvertinti ląstelių ciklą, pvz., Nustatant DNR kiekį ląstelėje.
Vykstant proliferacijai, ląstelė pereina ląstelių ciklą per fazes, kuriose padvigubina DNR kiekį. Įvertinus šią sumą, galima nurodyti, kurioje ląstelių fazėje yra, ar jos dauginasi, ar ne, ar patenka į apoptozę. Kitaip tariant, srauto citometrijos pagalba galite sužinoti, ar ląstelės ruošiasi apoptozei, užprogramuotam mirties procesui.
Srauto citometrija - ateitis
Srauto citometrija buvo žinoma ir naudojama medicinoje kelis dešimtmečius. Tačiau jis nuolat tobulinamas ir sukuria naujas diagnostikos ir tyrimų galimybes. Pirmuoju šio metodo naudojimo laikotarpiu buvo įmanoma nustatyti tik ląstelių dydį ir granuliuotumo laipsnį.
Lazerio šviesos naudojimas srauto citometrijos prietaisuose leidžia sužadinti tam tikrus fluorescencinius žymenis ir tada įvertinti jų spinduliavimą. Šiuolaikiniai citometrai leidžia žymiai padidinti žymenų, kurie vertinami vienu metu, skaičių, o tai neabejotinai padidina šio metodo jautrumą.
Štai kodėl jis naudojamas ne tik diagnozuojant neoplastines ligas, bet ir įvertinant gydymo efektyvumą.
Apie autorių
Skaitykite daugiau šio autoriaus straipsnių
